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第1章 综述1

1.1概述1

1.2地黄生产中存在的问题1

1.2.1地黄品种退化的原因2

1.2.2地黄病毒病的危害5

1.2.3防止地黄品种退化的措施6

1.3地黄组织培养的研究进展8

1.3.1以根为外植体8

1.3.2以茎尖和茎段为外植体9

1.3.3以叶片为外植体10

1.3.4以花粉为外植体10

1.3.5小结11

1.4地黄种质资源保存的研究13

1.4.1药用植物种质资源保存的意义13

1.4.2药用植物种质资源的研究14

1.4.3植物种质资源离体保存的研究16

1.4.4地黄种质资源保存的现状21

1.4本研究的目的和意义21

第2章 材料与方法24

2.1试验材料24

2.2.1培养基及培养条件24

2.2.2无菌苗的获得24

2.3内源生长物质提取及检测25

2.4数据处理25

3.1前言26

第3章 试管地黄的诱导26

3.2材料和方法27

3.2.1材料27

3.2.2培养基及培养条件27

3.2.3无菌苗的获得和幼苗的继代培养27

3.2.4幼苗的生根培养27

3.2.5试管地黄诱导培养27

3.3结果与分析28

3.3.1无菌体系的建立28

3.3.2试管地黄的诱导28

3.4讨论40

4.1前言43

第4章 试管地黄形成过程中内源激素变化的研究43

4.2材料和方法45

4.2.1材料45

4.2.2方法46

4.3结果与分析49

4.3.1试管地黄不定根膨大过程中内源激素含量的变化49

4.3.2试管地黄不定根迅速膨大时期各器官内源激素的含量51

4.4讨论52

第5章 地黄叶片器官形态建成的研究56

5.1前言56

5.2材料和方法57

5.2.1材料57

5.2.2培养基及培养条件57

5.3.1叶片直接再生不定芽58

5.3果与分析58

5.2.4叶片直接再生植株和试管地黄的诱导培养58

5.2.3无菌苗的获得和苗的继代培养58

5.3.2从叶片直接诱导试管地黄63

5.4讨论66

第6章 地黄叶片器官形态建成中几种内源激素的变化69

6.1前言69

6.2材料和方法70

6.2.1实验材料70

6.2.2方法71

6.3结果与分析71

6.3.1地黄叶片器官形态建成中IAA含量的变化71

6.3.3地黄叶片器官形态建成中ABA含量的变化72

6.3.2地黄叶片器官形态建成中GA3含量的变化72

6.3.4地黄叶片器官形态建成中JA含量的变化73

6.4讨论74

第7章 试管地黄形成过程中形态发生的研究77

7.1前言77

7.2材料和方法78

7.2.1材料78

7.2.2方法78

7.3结果与分析79

7.3.1试管地黄不定根初生结构的分化和早期的次生生长79

7.3.2试管地黄块根的形成发育过程及其结构80

7.3.3试管地黄与自然条件下生长的地黄的结构比较81

7.4讨论82

8.1前言87

第8章 玻璃化法超低温保存地黄茎尖的研究87

8.2材料和方法89

8.2.1植物材料89

8.2.2茎尖的预培养89

8.2.3装载与脱水89

8.2.4化冻、成活率检测与再生植株培养89

8.2.5茎尖含水量测定90

8.2.6可用性糖含量测定90

8.3结果与分析90

8.3.1蔗糖对预培养中茎尖含水量、可溶性糖含量和存活率的影响90

8.3.2二甲基亚砜、乙酰胺对茎尖超低温冻存后成活率的影响92

8.3.3PVS2预处理时间对茎尖超低温冻存成活率的影响93

8.3.4茎尖大小对超低温冷冻成活率的影响94

8.4讨论95

8.3.5保存时间对茎尖存活率的影响95

8.3.6茎尖植株的再生95

第9章 讨论97

9.1地黄试管块根的诱导与形成98

9.2试管地黄诱导与内源激素的关系99

9.3地黄叶片直接再生不定芽和不定根102

9.4地黄叶片形态建成与内源激素的关系103

9.5地黄试管块根解剖学结构104

9.6地黄茎尖的超低温保存105

9.7研究展望107

附录一 药用植物离体无性繁殖方法110

附录二 缩写词表174

参考文献175