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第一章 结核病实验室基本要求1

第一节 总则1

第二节 结核病实验室设置要求1

第三节 实验室生物安全管理要求3

第四节 实验室质量保证4

第二章 结核病实验室样本采集和保存5

第一节 样本采集的要求5

第二节 痰标本8

第三节 其他类型标本10

第三章 分枝杆菌菌株的保存、运输和管理11

第一节 菌株保存11

第二节 痰标本及菌株运输12

第三节 菌株保存、运输相关注意事项16

第四章 抗酸杆菌显微镜检查标准化操作程序18

第一节 萋-尼氏染色显微镜检查18

第二节 荧光染色显微镜检查25

第三节 液基夹层杯法27

第五章 分枝杆菌分离培养标准化操作程序32

第一节 分枝杆菌固体培养32

第二节 分枝杆菌液体培养39

第六章 分枝杆菌菌种鉴定标准化操作程序45

第一节 生化鉴定45

第二节 免疫学鉴定53

第七章 分枝杆菌药物敏感性测定标准化操作程序59

第一节 结核分枝杆菌固体药敏试验59

第二节 结核分枝杆菌液体药敏试验67

第三节 非结核分枝杆菌药物敏感性试验75

第八章 分枝杆菌核酸检测标准化操作程序88

第一节 传统实时荧光定量PCR检测88

第二节 半巢式全自动实时荧光定量PCR检测94

第三节 环介导等温扩增检测98

第四节 实时荧光核酸恒温扩增检测100

第五节 交叉引物恒温扩增检测102

第六节 基因探针检测105

第九章 分枝杆菌分子生物学菌种鉴定标准化操作程序111

第一节 核酸测序鉴定111

第二节 质谱技术鉴定114

第三节 核酸探针法鉴定116

第四节 基因芯片鉴定120

第五节 线性探针鉴定125

第十章 结核分枝杆菌耐药性分子检测标准化操作程序133

第一节 线性探针技术检测耐药133

第二节 基因芯片耐药检测139

第三节 实时荧光PCR熔解曲线耐药检测144

第十一章 结核病免疫学诊断标准化操作程序151

第一节 结核病免疫学诊断技术概述151

第二节 卡介苗菌结核菌素皮肤试验152

第三节 结核分枝杆菌结核菌素纯皮肤试验153

第三节 免疫斑点干扰素释放试验159

第四节 全血干扰素释放试验163

第五节 酶联免疫斑点干扰素释放试验167

第六节 结核抗体检测170

第十二章 结核分枝杆菌基因分型标准化操作程序179

第一节 限制性片段长度多态性分析179

第二节 间隔区寡核苷酸分型185

第三节 多位点可变数目串联重复序列分析190

第十三章 分枝杆菌测序检测技术标准化操作程序196

第一节 传统测序技术196

第二节 离子耐受测序法200

第十四章 仪器的使用与维护206

第一节 生物安全柜206

第二节 恒温培养箱208

第三节 离心机209

第四节 蒸气凝固器210

第五节 天平211

第六节 高压灭菌器212

第七节 显微镜214

第八节 聚合酶链式反应仪217

第九节 电泳仪218

第十节 凝胶成像仪219

第十一节 酶标仪220

第十五章 个人防护及废弃物处理操作程序222

第一节 隔离衣的使用222

第二节 呼吸防护用具的使用224

第三节 手套的使用226

第四节 鞋套和工作鞋的使用227

第五节 帽子的使用228

第六节 手卫生228

第七节 废弃物处理229

第八节 分枝杆菌的消毒229

第十六章 培养基制备与储存238

第一节 改良罗氏培养基239

第二节 药敏试验培养基243

第三节 液体、琼脂培养基245

附录1 分枝杆菌菌种分类与中文名称命名250

附录2 离心力换算表259